Extraction des pigments

Extraction des pigments

 

Pour extraire les pigments (se trouvant dans les plastes, vacuoles et le cytoplasme) il faut procéder de la manière suivante :

·         Découper les organes en petits morceaux

·         Triturer bien en présence de

o   Sable

o   Carbonate de magnésium

o   Carbonate de calcium

§  Ceci a pour but d'augmenter le contact du matériel végétal avec le solvant servant d'extraction

·         Au broyat ajouter de l'acétone (volume dépend de la masse du matériel végétal par exemple pour cinq grammes de matériel ajouter 10 ml de solvant)

·         Filtrer

·         Décolorer avec l'acétone (jusqu'à épuisement total des pigments)

·         Procéder à une extraction liquide/liquide :

·         Ether de pétrole/acétone  1V:1V

·         La phase acétonique est ensuite concentrée par évaporateur rotatif

·         Procéder à une analyse chromatographique sur couche mince ou sur papier :

·         On observera des fluorescences sous U.V.

o   Vert militaire : chlorophylle a

o   Vert : chlorophylle b

o   Jaune pâle : xanthophylle I

o   Jaune : xanthophylle II

o   Orange : carotènoïdes

§  b carotène I

§  lutéine I

§  lutéine II

§  violaxanthine III

§  néoxanthine IV

§  zéxanthine VI

§  anthéraxanthine VI

 

·         Les pigments sont nombreux et leurs colorations exigent de revoir certaines bibliographiques

·         De même par spectrophotométrie à partir d'extrait éthanolique ou chloroformique (pour le béta carotène). L'échelle d'absorption est variable pour chaque pigment (par exemple le chlorophylle a absorbe  à 663 nm et le chrophylle b à 654 nm)